分子检测用尼龙膜
自从1970年发现可以将生物分子直接点到薄膜上或者从凝胶转移生物分子以来,薄膜一直是生命科学实验室的标准工具。用于分子检测的第一种薄膜用硝化纤维制成,该纤维对生物分子有高亲和力,用于许多可提供检测技术的低背景。由于难于操作和热接触,导致需要寻找替代背衬支撑。
对于核酸,尼龙膜具有更高结合力、结构完整性可承受固定温度、检测和重新标记涉及多个步骤。
核酸检测
在基因组学研究和分子诊断应用的结果解释方面,检测技术很重要。样本数变得越来越少、越来越不足,例如法医分析需要背景强度极低的高度灵敏检测平台。颇尔理解您需要提高灵敏度,我们在生产核酸检测用薄膜方面拥有30多年的经验,可确保稳定的批次间和印迹间性能。颇尔首次将尼龙膜用于核酸转移技术,现在我们的薄膜已经成为世界各地领先实验室核酸检测应用的标准。
我们的尼龙膜使用尼龙6,6聚合物浇铸而成,多数无极性,但末端有氨基和羧基。形成薄膜后,分子呈现如下所示的结构。(图3)疏水区在微孔表面折叠,因此露出末端极性基团。因此,疏水分子也可以形成亲水膜。
尼龙6,6膜用于核酸检测可提供优异的分辨率、高灵敏度和低背景。我们的尼龙膜固有亲水性,不需要预润湿,因此可增加易用性。这些薄膜为关键分子生物应用的“黄金标准”,例如法医检测,建议用于所有核酸检测程序以及蛋白质斑点ELISA。典型核酸检测程序需要多重杂交、剥离和重新标记,需要高度耐久的薄膜。我们的薄膜具有高拉伸强度,在此类条件下也不会收缩、破裂或撕裂。我们提供4种不同化学特性的薄膜,可用于各种应用。本节末尾的选择图表将帮助为您的应用选择最佳薄膜。
选择用于核酸程序的薄膜时,考虑所需相对灵敏度水平、所用检测系统以及是否进行多重标记很重要。以下薄膜适用于核酸转移和检测应用。
Biodyne®A-两性尼龙薄膜是一种不带电荷的尼龙6,6薄膜。它对生物分子有高结合能力,可提供高灵敏度和核酸滤留。特别适用于化学发光、碱性磷酸酶或背景存在问题的其它检测系统。
Biodyne B-正电荷尼龙膜具有微孔表面,表面上含有高密度的季铵基,使其呈强阴离子性。这种正电荷可在宽pH范围内保持,促进核酸的强离子结合,使其理想用于核酸转移和检测。这种正电荷尼龙膜将与放射性探针产生最大的灵敏度。
Biodyne Plus-使用等电点薄膜的正电荷尼龙,与正电荷尼龙膜类似,这种薄膜含有微孔表面,表面上含有高密度的季铵基。该膜的等电点极高,灵敏度高于中性尼龙,呈现背景低于标准带正电的尼龙膜。这是我们最灵敏的核酸检测用尼龙膜,建议用于产生高背景的检测系统。
Biodyne C-负电荷尼龙膜具有空隙表面,表面上含有大密度的羧基。该薄膜通过与这些基团的耦合反应制得,理想用于反向点杂交和亲和纯化。